支原體感染的觀察與檢測：相差顯微鏡與熒光顯微鏡的應用

支原體是一種常見的病原體，可引起各種疾病，其中最常見的是肺炎。支原體可獨立存活，不侵入機體組織與血液，直徑0.2～0.3恥塵，結構簡單，球形，沒有細胞壁，只有叁層結構的細胞膜，故具有較大的可變性，因此支原體感染的檢測對于診斷和治療支原體引起的疾病至關重要。

支原體主要黏附在細胞膜上生存，沒有細胞壁，通常呈圓形或橢圓形，一般呈末端尖銳、表面有許多小突起的形態特征，可以使用相差顯微鏡或者熒光顯微鏡觀察檢測支原體，有助于診斷和治療支原體引起的疾病。（注意事項：支原體與細胞破碎后溢出的細胞內容物如線粒體等頗相似，應細加區別。）

1.相差顯微鏡檢測法

相差顯微鏡能夠觀察活細胞和未染色的標本，可以觀察到支原體呈暗色微小顆粒，有類似布朗運動的表現，在細胞表面或細胞之間游離或成群分布的形態和排列方式。

2.熒光顯微鏡檢測法

熒光顯微鏡觀察需要使用特殊的熒光染料或抗體對支原體進行標記，根據熒光反應判斷是否感染。一般來說，支原體感染的細胞在熒光顯微鏡下會呈現出綠色或紅色熒光，這取決于所使用的熒光染料和抗體。

在呼吸道九聯檢查中也包含支原體肺炎檢測，在熒光顯微鏡下，如果觀察到紅色細胞外圍出現明亮的綠色熒光反應，且形態為明顯的細胞膜或者胞漿，則可以判定為陽性，這些綠色的熒光信號標記的就是肺炎支原體。這是因為肺炎支原體在受到特定熒光染料的標記后，會發出綠色熒光。

相反，如果紅色細胞周圍無熒光或少量綠色熒光，且熒光較弱，則判定為陰性，這意味著樣本中未檢測到肺炎支原體。

適用觀察檢測支原體，提供明場、暗場、相襯的通用聚光鏡，可選配落射式垂直熒光照明器，光源采用 LED 光源，便于得到高分辨率、高對比度的圖像。

熒光顯微鏡觀察診斷支原體肺炎適合于各種臨床情況，尤其適用于首診檢測陰性，但復診仍然懷疑肺炎支原體感染的情況。由于其操作簡便、結果直觀，因此成為一種簡單、直觀、容易實現的觀察和診斷方式。